第三步：精液品質檢查
待精液液化后，進行精液常規分析
收集精液后，還需要保證精液的質量。待精液液化后，進行精液常規分析，需要對精液量、外觀、pH值等方面進行檢測。最后還要在實驗室里檢查精子的運動能力，還有活精子所占的百分比等。此外還要檢測精子的密度，以及精子的形態等，比如精子的畸形率和精子頂體異常率。根據精液質量選擇不同方法進行優選處理，挑選及格的精液置于37℃，待用。
人工授精對精液質量有著明確的要求：要求復蘇后精液前向運動精子總數不得低于10×10/ml，前向運動的百分率不得低于35%，這是保證能夠正常受孕的最低標準。
第四步：檢查和預測女性的排卵日
估計女方的排卵日，以選擇最佳的授精時間
光把精子準備好了，卵子不配合的話也是懷不上的。需要估計女方的排卵日，以選擇最佳的授精時間。常用的估計排卵日的方法包括測定基礎體溫、宮頸粘液（一般在排卵前4-5天出現），或接近排卵日連續測定尿黃體生成素的峰值，或連續陰道超聲波檢查等。
這個階段，醫生會根據女方的排卵狀況幫你選擇是在自然周期還是促排卵周期中進行人工授精。自然周期指不借助促排藥物的情況下，女性按照自身排卵規律，檢測到排卵情況進行人授。反之，則是促排周期。
每位女性在一個月經周期中可進行3次人工授精，即在排卵日前3天開始，若按小時計算，即在排卵日前72小時、24小時和排卵后24小時各進行一次，若在一個月經周期中未能受孕，可連續做幾個周期。必要時可用藥物誘導排卵和調整好排卵期，以提高受孕率。判定人工授精的成敗一般以12個周期為界。
